pPIC3.5K 载体

质粒类型: 毕赤酵母表达载体
表达水平: 高拷贝
启动子: AOX1
克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
载体大小: 9004 bp (查看载体序列)
5' 测序引物及序列: 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´
3' 测序引物及序列: 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´
载体抗性: Ampicillin (氨苄青霉素),Kanamycin(卡那霉素)
筛选标记: HIS4
备注:
插入基因是必需包含起始密码子ATG。
产品编号 产品名称 规格 价格
VT1342 pPIC3.5K 2ug 点击询价

pPIC3.5K是一个鉴定多拷贝基因插入到毕赤酵母基因组中的载体。 1. pPIC3.5K载体大小为9004 bp。 2. 在多克隆位点区域,拥有5个单一的限制性酶切位点:BamH I,Snab I,EcoR I,Avr II和Not I。 3.胞内表达。 4.载体构建时,需要包含一个ATG启动子,同时需要加入Kozak序列。 (Cavener and Stuart, 1991; Kozak, 1987; Kozak, 1990) 5. 毕赤酵母中使用HIS4基因筛选。 6.  将基因插入GS115和KM71的AOX1中,需要使用Sac I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+,KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。 7. 将基因插入GS115和KM71的HIS4中,需要使用Sal I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+,KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。 8. 将基因插入GS115的AOX1基因中,也可以使用Bgl II 限制酶线性化质粒,产生的酵母基因型为His+ MutS。